Jednoduché kroky pro tvorbu pufru citrátu sodného

V šesti jednoduchých krocích se naučíte, jak vytvořit pufr citrátů sodíku. Citrát sodný nebo citrát trisodný mohou pufrovat roztoky v rozmezí pH od 3 do 6. 2. Kyselinu citronovou může dělat také práci.

Pufr citronanu sodného se používá k izolaci RNA, protože minimalizuje bázickou hydrolýzu pramenů RNA. Toto činí důležitý krok při čištění mRNA během genomického výzkumu nebo při studiu transkripce.

Pufry na bázi citrátu mohou také pomoci detekci antigenů v fixovaných tkáňových preparátech, protože narušují vytvářené křížové vazby mezi antigeny a fixačními médii.

Pomocí níže uvedeného průvodce proveďte pufr citrátu sodného o pH 6. Pokyny jsou nejen snadné, ale i rychlé. Měli byste trvat jen asi 10 minut, než dokončíte tyto kroky.

Dvě možnosti pro vytvoření vyrovnávací paměti

Existují dva způsoby, jak jít o vytvoření pufru citrátu sodného. Nejdříve zjistěte, zda máte kyselinu citrónovou i konjugovanou bázi, citrát sodný. Pokud máte pouze kyselinu citronovou, není to problém. Stále můžete vytvářet vyrovnávací paměť.

Na druhou stranu, pokud máte kyselinu i základnu, vytvořte zásobní roztok každého z nich. Smíchejte 21 gramů kyseliny citronové v 1 litru destilované vody a 29,4 gramů citronanu sodného v 1 litru destilované vody.

Pokud máte pouze kyselinu citrónovou, promícháme 2 litry v 1 litru destilované vody a pokračujeme v dalším kroku.

Míchání roztoků kyseliny citrónové a citrátu sodného

Teď, když jste vytvořili zásobní roztok (pokud jste měli kyselinu i základnu) nebo jste smíchali kyselinu v destilované vodě (pokud jste ne), můžete zaměření na vaše řešení.

82 mililitrů roztoku kyseliny citronové se smíchá s 18 mililitry roztoku citronanu sodného.

Pak celkový objem směsi až deset litrů s destilovanou vodou. Ponechte dostatečný objem, aby bylo možné přidávat hydroxid sodný (NaOH) v dalším kroku.

Nastavení pH

Při mírném míchání roztoku magnetickým míchadlem použijte 1M hydroxid sodný pro úpravu pH směsi na hodnotu 6. Potom proveďte finální objem roztoku do 1 litru destilované vody pomocí odměrné baňky.

Co potřebujete k vytvoření vyrovnávací paměti

Nejen, že nebudete trvat příliš dlouho, než vytvoříte pufr s citrátem sodným, ale ani pro něj nebudete potřebovat mnoho materiálů. S kyselinou citronovou, 1M hydroxidem sodným, destilovanou vodou a kalibrovanou pH sondou se dostanete do poloviny. Použití citrátu sodného je nepovinné.

Vytvoření vyrovnávacího zásobníku bude rovněž vyžadovat 1litrový odměrný válec, 1litrovou odměrnou baňku a tři 1litrové lahve s médii. Nakonec budete potřebovat magnetickou míchací tyč a magnetické míchadlo.

Pokud nemáte všechny tyto materiály, zvažte použití laboratoře ve škole nebo na pracovišti, takže je nemusíte zakoupit sami. Tyto materiály můžete také snadno zakoupit online nebo navštívit prodejny specializovaných výrobků ve vaší oblasti.